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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
QGY-7701(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸組氨瑞林 Histrelin Acetate質量規格：BR,度>98%

人結直腸腺癌細胞;COLO 205青霉素V鉀Penicillin V potassium salt質量規格：1440~1680 U/mg,BR

CD47 Others Human 人 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧肌苷2'-deoxyinosine質量規格：>98%,BR

mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓鹽酸尼非卡蘭Nifekalant 質量規格：>98%,BR

3T3TK細胞，小鼠成纖維細胞 TNFa轉染耐VP16絨癌細胞,JEG-3-VP16-TNFa細胞 人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg鹽酸尼非卡蘭(標準品)Nifekalant 質量規格：HPLC>99%,標準品
EJ(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2 肺大靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)Paeoniflorin質量規格：≥50%,BR

間充質干細胞脂肪細胞分化培養基MADM-prf芍藥苷(90%)Paeoniflorin質量規格：≥90%

CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5,6-二-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))5,6-Dimethyl-1,10-phenanthroline質量規格：>98.0%(T)

大鼠肺成纖維細胞*培養基 100mL2,9-二丁基-1,10-鄰二氮雜菲(>96.0%(HPLC))2,9-Dibutyl-1,10-phenanthroline質量規格：>96.0%(HPLC)

CTLA4 Ig-24細胞，中國倉鼠卵巢細胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人卵巢癌細胞) CM-H002人肺大動脈內皮細胞*培養基100mL2,9-二苯基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))2,9-Diphenyl-1,10-phenanthroline質量規格：>98.0%(HPLC)(T)
CL-0046C4-2(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×25--2-脫氧胞苷25克

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系6-溴己醋 6-BroMohqxcnoic ccid;6-BroMoccproic ccid 44-70-8

EB病毒轉化的人B細胞(彝族);HYL 人腹膜內皮細胞*培養基 100mLSILVERnitnATE肖酸銀蛋白組學級25GRT

牛腦垂體提取物BPE麗春紅2R100克2～8°C

EPHB2 Others Mouse 小鼠 EphB2 / Hek5 人細胞裂解液 (陽性對照) POPSO 10g/100g原裝 Sigma P3405
肌氨酸氧化酶EB病毒轉化的人B細胞;KMY0909 人軟骨細胞*培養基 100mL頭孢呋辛鈉(標準品)Cefuroxime  質量規格：效價測定

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5頭孢曲鈉Ceftriaxone  質量規格：potency>980ug/mg,BR

IFNB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢曲鈉（標準品）Ceftriaxone  質量規格：HPLC>98%,標準品

CL-0197RL95-2(人內膜癌細胞)5×106cells/瓶×2頭孢他啶(含碳酸鈉)Ceftazidime with  Carbonate 質量規格：94.0-105.0%,USP,BR

Hut-78細胞，皮膚T細胞瘤 人血管平滑肌,T/G細胞 人低侵襲性脈絡膜色素素瘤細胞;OCM-1A頭孢唑啉鈉Cefazolin 質量規格：>95%,BR
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。