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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CASK Others Human 人 CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 環丙沙星-d8鹽酸鹽質量規格：美國進口Ciprofloxacin-d8,

角膜內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸環丙沙星質量規格：美國進口Ciprofloxacin HCl

小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記) 人肺腺癌細胞，SW 1271[SW-1271;SW1271]細胞 LLC Lewis(肺癌細胞)去乙酰泛昔洛韋質量規格：美國進口Desacetyl Famciclovir

人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M176-去氧噴昔洛韋質量規格：美國進口6-Deoxypenciclovir

TIMD4 Others Mouse 小鼠 TIMD4 / TIM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 脫水長春堿（標準品）質量規格：HPLC≥95%，標準品Anhydrovinblastine
小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]鹽酸氨基脲質量規格：>98%,BRAminourea

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸鏈霉素滅菌溶液，30 mg/ml質量規格：Sterile滅菌溶液,30mg/mlStreptomycin sulfate solution, 30 mg/ml

EB病毒轉化的人B細胞;KM932硫代硫酸銨質量規格：>99%,BRAmmonium thiosulfate

6. 腸胃細胞系統鹽酸氨丙啉(>99%,BP)質量規格：>99%,BPAmprolium

CL-0398NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2三氧化二銻(>98%,BR)質量規格：>98%,BRAntimony (III) oxide
A172細胞，人膠質母細胞瘤細胞 桔青霉 人表皮色素細胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg特級胎牛血清容量：RT，避光1克

RWPE-2(人前列腺正常細胞) 5×106cells/瓶×2錄坐西林內 Cloxccillin wo7ium 7081-44-9

HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1天青I;亞天青;蔚藍I czurq I;czurI(GiqMsc) 231-22-2

人尿道上皮細胞RNAHUC miRNA5 μg3-甲氧基酚500克

FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人細胞裂解液 (陽性對照) 崩潰酶(+4℃)NA
微球菌粉EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)二乙二醇(標準品)Diethylene glycol質量規格：分析標準品

COLO 201(人結直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))Diethylene glycol質量規格：Standard for GC,≥99.5%(GC)

人內根殼細胞cDNAHHIRSC cDNA十二醇(標準品)1-Dodecanol質量規格：Standard for GC,>99%(GC)

CLEC3B Others Human 人 CLEC3B / Teanectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 直接藍6(標準品)DIRECT BLUE 6質量規格：分析標準品

A9 小鼠皮下結締組織細胞分散橙37(標準品)Disperse Orange 37質量規格：分析標準品
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。