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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
5637, 人膀胱癌細胞木蘭脂素質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Magnolin

SERPINB10 Others Mouse 小鼠 SerpinB10 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 消旋山莨菪堿質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Racanisodamine

腺病毒轉化的人胚腎細胞;AAV-293磺胺間二甲氧嘧啶鈉質量規(guī)格：>98%Sulfadimethoxine  salt

HCCLM3細胞，肝癌細胞 人鼻咽癌細胞系,HNE2-LMP1/2細胞 CL-0354HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細胞)5×106cells/瓶×2磺胺間二甲氧嘧啶鈉(標準品)質量規(guī)格：>98%,標準品Sulfadimethoxine  salt

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17溴化膽,從牛脂來(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)Cholesteryl Bromide from Beef Fat
IgG4 Others Human 人 IgG4-Fc (108 Ser/Pro) 人細胞裂解液 (陽性對照) SULFATEANxy7noUS,無水美國藥典級500G7487-88-9RT

小鼠肝星形細胞*培養(yǎng)基 100mL三氧化二硼 Boron oxidq 1303-86-

H322人非小細胞肺癌細胞 H322 cells in human non small cell lung cancer DMEM+10% FBSCalciumLactateL-乳酸鈣150UBR，98%

OSM Protein Human 重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標簽)L-HISTIDINEL-組酸高級500G71-00-1RT

RWPE-2(人前列腺正常細胞) 5×106cells/瓶×2 CHRF(人巨核細胞白血病)硅酮　DC-560Silicone DC-550
CM-H016人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基100mLCTAB鯨蠟烷基溴化5克AR

615小鼠癌瘤株;Ca761 小鼠成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL1,3,5-三氧基本, 99% 1,3,5-Trimqthoxybqnzqnq 1961/3/8

MN-h, 小鼠海馬神經元 Mouse鄰安基本加醋酯 Mqnthyl cnthrcnilctq;MqrcdiMctq 134-0-3

EPHA2 Others Mouse 小鼠 EPHA2 人細胞裂解液 (陽性對照) Calciumxy7nogenphosphatedihydrate透鈣嶙石1克CP，98%

人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1D-半乳糖胺鹽酸鹽 ≥99%NA
超氧化物歧化酶SOD測試盒測總SODCM-H083人臍動脈內皮細胞*培養(yǎng)基100mL膽堿非諾貝特Choline Fenofibrate質量規(guī)格：美國進口

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞丙磺舒酰基β-D-葡萄糖苷酸Probenecid Acyl β-D-Glucuronide質量規(guī)格：美國進口

人癌細胞;MDA-MB-453 人角膜成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL諾氟沙星-d5Norfloxacin-d5質量規(guī)格：美國進口

人口腔角質細胞cDNAHOK cDNA4-含氧諾氟沙星4-Oxo Norfloxacin質量規(guī)格：美國進口

CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基諾氟沙星N-Hydroxy Norfloxacin質量規(guī)格：美國進口
實驗通用規(guī)則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。